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在使用超微量核酸蛋白測定儀的過程中我們容易對它造成什么誤區

更新時間:2018-10-19      點擊次數:1700
   在使用超微量核酸蛋白測定儀的過程中我們容易對它造成什么誤區
  
  超微量核酸蛋白測定儀設計特點:
  
  1、雙光束、高精度、多色器光學檢測系統,像差校正光柵和二極管陣列檢測器提供可靠的檢測結果
  
  2、檢測光程固定,儀器內部沒有移動的光學部件,檢測光程為10mm。
  
  3、采用超長壽命的氙閃燈,開機后無需預熱即可工作
  
  4、可選配5.7英寸彩色觸摸控制器進行單機操作,也可連接電腦操作
  
  超微量核酸蛋白測定儀應用:
  
  用于生命科學領域的核酸蛋白定量分析,如進行DNA、RNA、蛋白質、細胞等樣品的紫外/可見光檢測。
  
  數據多種導出格式(EXCEL、PPT等)方便保存和數據統計分析。
  
  超微量核酸蛋白測定儀注意事項:
  
  1、偵測后立即使用拭鏡紙擦拭臺面。先取一張將上下臺面的液體吸走,再吸過樣品的面反折到內部,折迭四次后以單方向多次擦拭臺面(DNA擦5次,Protein擦20次)。
  
  2、同一滴液體只能做一次偵測,欲重復定量同一樣品,請擦掉前一滴,重新取出一滴進行偵測。
  
  3、基本上核酸樣品可使用1~2ul做測量,隨各液體體積特性之不同會有不同體積需求,原則上不超過2ul。并請使用2ul避免體積不足導致液柱無法完整形成。唯蛋白質樣品因呈色劑與蛋白質本身特性,務必使用2ul進行偵測。
  
  4、當軟件跳出錯誤訊息時,請詳細閱讀并依指示進行障礙排除。常發生的情形是在偵測過程液柱并未正確形成,軟件會出現以下訊息。可先用肉眼觀察液柱是否未完整連接上下臺面,或樣品內有泡泡,將上臂拉起后,擦掉該滴樣品,再重新進行偵測,必要時可將樣品體積加大至2ul。
  
  5、不可使用含有HydrofluoricAcid(HF)之樣品,其它無腐蝕性之液體皆可使用。
  
  超微量核酸蛋白測定儀的使用誤區:
  
  1)測量核酸時發現結果不準:首先要確定核酸樣品的純度,如果是DNA樣品,260/280比值應該在1.6-2.0之間。比值小于1.6說明有蛋白類物質的干擾,大于2.0說明有RNA的干擾。如果是RNA樣品,260/280應該大于2.0,如果值偏高如2.5以上,可能是RNA降解的原因,如果小于2.0說明有蛋白類物質的干擾。我們還可以通過230nm、和320nm處的吸收峰來判斷樣品的純度,230表示存在以下污染物如:碳水化合物、多肽、苯酚等,核酸和蛋白在320nm處的吸收峰幾乎為零,所以如果有吸收說明有雜質,可能是稠環芳香有機試劑的污染。
  
  2)適合測量純度高的蛋白樣品,不能測量含有雜質的蛋白樣品:通過上面的公式我們能夠發現,c值是與吸光度A成正比的,如果樣品中含有雜質成分,且雜質在280處有吸收峰的話就會造成測量值不準,一般我們提蛋白過程中使用的有機試劑如果殘留的話就會造成測量蛋白值不準的情況。
  
  3)測量兩個樣品中間務必要用吸水的面巾紙和蒸餾水清潔測量臂:如果不做清潔,殘留的樣品會對后來樣品的測量造成影響。切記不要用擦鏡紙擦拭,因為擦鏡紙不吸水。
  
  4)測量同一個樣品的時間不宜過長:因為上樣量很少,隨著時間的推遲樣品會有所蒸發,造成測量出來的濃度有誤差。
  
  5)如果測量值不是很準,建議可以把樣品稀釋到適當濃度再進行測量。
  
  6)如果感覺機器的平衡性不好,可以通過以下方法檢測:以空氣為blank,反復測量空氣,兩次測量之間間隔5秒,測出的吸光度值應該小于0.04,說明平衡性良好。
  
  

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